elisa的检测方法是什么？ 介绍ELISA检测方法

1.ELISA是酶联免疫吸附法 (Enzyme-linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 简称。是指在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型免疫测定技术。

(资料图片)

2、原理如下： （1）将抗原或抗体结合到某些固相载体表面，并保持其免疫活性。

（2）将抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，既保留了其免疫活性，又保留了酶的活性。测定时，将待检标本(测定的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同工艺与固相载体表面的抗原或抗体发生反应。固相载体上形成的抗原抗体复合物通过清洗与其他物质分离，最终将固相载体上的酶量与标本中待检物质的量成一定比例。添加酶反应的底物后，底物被酶催化成有色产物，产物的数量与标本中待检物质的数量密切相关，因此可以根据颜色反应的深度进行定性或定量分析。

由于酶的催化频率很高，反应效果可以大大放大，从而使测定方法达到很高的敏感性。

elisa 检测方法是什么？

ELISA是酶联免疫吸附法 (Enzyme-linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 简称。指在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型免疫测定技术 。

原理如下：①将抗原或抗体结合到一定的固相载体表面，并保持其免疫活性。

②将抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，既保留了它们的免疫活性，又保留了酶的活性。测定时，将待检标本(测定的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同工艺与固相载体表面的抗原或抗体发生反应。固相载体上形成的抗原抗体复合物通过清洗与其他物质分离，最终将固相载体上的酶量与标本中待检物质的量成一定比例。添加酶反应的底物后，底物被酶催化成有色产物，产物的数量与标本中待检物质的数量密切相关，因此可以根据颜色反应的深度进行定性或定量分析。

由于酶的催化频率很高，反应效果可以大大放大，从而使测定方法达到很高的敏感性。

ELISA有哪些方法？

所有ELISA测试方法的缺点都很明显：1、重复性差；2、受自身抗体、嗜异性抗体等影响，易发生假阳性；3、无论是仪器还是手工操作，都有很多干扰因素。温度和时间影响较大。

1.直接法（direct ELISA）将抗原直接固定在固相载体上，参与酶标记的一级抗体可以测量抗原的总量。这种一级抗体的非特异性非常重要。

优点：操作程序简单，因为不需要使用二抗来防止交互反应。缺陷：试验中的抗体应用酶标记，但并非每种抗体都能标记，成本相对较高。2.间接法（indirect ELISA）这种测定方法类似于直接方法。不同的是，一级抗体没有酶标记，用酶符号的二级抗体来识别一级抗体来测量抗原量。优点:二抗可以增强信号，有很多选择可以做不同的测量分析。

没有酶标记的一级抗体可以储存其最大的免疫反应。缺陷:交互反应发作的概率很高。3.双抗体三明治法（sandwich ELISA）被检测的抗原包在两个抗体之间，其中一个将抗原固定在固相载体上，即捕获抗体。

另一种是检测抗体，用酶标记后可以直接测量抗原的量；或者没有标记，然后用酶符号的二次抗体测量抗原的量。这两种抗体必须仔细选择，以避免相互反应或竞争相同的抗原连接位置。优点：活性高，专业化程度高，抗原不需要提前净化。

缺陷：抗原必须有多个抗体连接位置。4.竞争法（competitive ELISA）样品中的抗原（自由抗原）与纯化固定在固相载体上的抗原（固定抗原）竞争相同的抗体。样品中的自由抗原越多，抗体就越多，固定抗原只能接触较少的抗体，反之亦然。在清洗过程中，自由抗原和抗体的复合物被冲走，只留下固定抗原和抗体的复合物。与固定抗原的对照组成效果相比，样品中的抗原含量可根据颜色差计算。

优点：可适用于不良样本，数据再现性高。缺陷：整体敏感性和专一性较差。

elisa实验的原理是什么？

ELISA的实验原理是酶分子与抗体或抗体分子的结合，它不会改变抗体的免疫特性，也不会影响酶的生物活性。酶标记抗体可与固相载体上吸附的抗原或抗体结合。

滴入底物溶液后，底物可以在酶的作用下将其所含的氢气从无色还原型转变为有色氧化型，产生颜色反应。

因此，可以通过底物的颜色反应来判断是否有相应的免疫反应，颜色反应的深度与标本中相应的抗体或抗原的数量成正比。这种显色反应可以通过ELISA检测仪进行定量测量，将酶化学变化的敏感性与抗原抗体反应的特异性相结合，使ELISA方法成为一种特殊而敏感的检测方法。扩展材料：ELISA试验的基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体中 ( 少量聚乙烯反应板 ) 表面，使酶标记的抗原抗体在固相表面发生反应，用洗涤法清除液相中的分散成分。常见的 ELISA 该方法包括双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于检测特定抗体。

ELISA已广泛应用于各种细菌和病毒的诊断。在动物检疫方面，ELISA已广泛应用于猪传染性胃肠炎、牛副肺结核、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断。

elisa有几种类型，原理是什么？

1.类型的三明治法常用于检测大分子抗原，将特定的抗体固定在塑料孔板上，洗掉多余的抗体，重复两次，洗掉多余的二次抗体，加入酶底使酶呈色，用人眼或仪器读取呈色结果。间接法常用于检测抗体，将已知的抗原固定在塑料孔板上，洗掉多余的抗原，重复两次。

洗掉多余的未键二次抗体，加入酶底物使酶呈色，通过仪器测量塑料板中的吸光值，评估有色终产品的含量，测量待测抗体的含量。

竞争方法是一种较少使用的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，将特定抗体固定在塑料孔板上，清除多余抗体；添加被测体，含酶抗原，与塑料孔板上的抗体特定键结。塑料孔板上固定抗体的数量并不多。体检中抗原的数量越多，含酶的抗原就越少。2、原理是将待检标本和酶标抗原或抗体按不同工艺与固相载体表面抗原或抗体发生反应。固相载体上的抗原抗体复合物通过洗涤与其他物质分离，最终将固相载体上的酶量与标本中待检物质的量成一定比例。

添加酶反应的底物后，底物被酶催化成有色产物，产物的数量与标本中待检物质的数量密切相关，因此可以根据颜色反应的深度进行定性或定量分析。扩展材料:Elisa应用Elisa生物实验敏感性高，非特异性强，重复性好。由于其试剂稳定、易储存、操作方便、结果判断客观等因素，已广泛应用于免疫检测的各个领域。

ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中抗人戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗体ELISA检查。

标签：